口蹄疫的防控和检验检疫

    口蹄疫Aftosa（属一类传染病）俗名“口疮”、“辟癀”，是由口蹄疫病毒所引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病。主要侵害偶蹄兽，偶见于人和其他动物。其临诊特征为口腔粘膜、蹄部和乳房皮肤发生水疱。

1．病原

    口蹄疫病毒属于微核糖核酸病毒科口蹄疫病毒属，是目前所知病毒中最细微的一级。其最大颗粒直径为23nm，最小颗粒直径为7-8nm。目前已知口蹄疫病毒在全世界有七个主型A、O、C、南非1、南非2、南非3和亚洲1型，以及65个以上亚型。O型口蹄疫为全世界流行最广的一个血清型，我国流行的口蹄疫主要为O、A、C三型及ZB型（云南保山型）。据观察，一个地区的牛群经过有效的口蹄疫疫苗注射之后，1~2月内又会流行，这往往怀疑是另一型或亚型病毒所致。这是因为该病毒易发生变异。该病毒对外界环境的抵抗力很强，在冰冻情况下，血液及粪便中的病毒可存活120 - 170天。阳光直射下60分钟即可杀死；加温85℃15分钟、煮沸3分钟即可死亡。对酸碱之作用敏感，故1% - 2%氢氧化钠、30%热草木灰、1% - 2%甲醛等都是良好的消毒液。

2．流行病学

    牛尤其是犊牛对口蹄疫病毒最易感，骆驼、绵羊、山羊次之，猪也可感染发病。本病具有流行快、传播广、发病急、危害大等流行病学特点，疫区发病率可达50%~100%，犊牛死亡率较高，其他则较低。病畜和潜伏期动物是最危险的传染源。病畜的水疱液、乳汁、尿液、口涎、泪液和粪便中均含有病毒。该病入侵途径主要是消化道，也可经呼吸道传染。本病传播虽无明显的季节性，且春秋两季较多，尤其是春季。风和鸟类也是远距离传播的因素之一。

3．临床症状

    该病潜伏期1-7天，平均2-4天。病牛精神沉郁，闭口，流涎，开口时有吸吮声，体温可升高到40 -41℃。发病1-2天后，病牛齿龈、舌面、唇内面可见到蚕豆到核桃大的水疱，涎液增多并呈白色泡沫状挂于嘴边。采食及反刍停止。水疱约经一昼夜破裂，形成溃疡，这时体温会逐渐降至正常。在口腔发生水疱的同时或稍后，趾间及蹄冠的柔软皮肤上也发生水疱，也会很快破溃，然后逐渐愈合。有时在乳头皮肤上也可见到水疱。本病一般呈良性，经一周左右即可自愈；若蹄部有病变则可延至2-3周或更久；死亡率1% -2%，该病型叫良性口蹄疫。有些病牛在水疱愈合过程中，病情突然恶化，全身衰弱、肌肉发抖，心跳加快、节律不齐，食欲废绝、反刍停止，行走摇摆、站立不稳，往往因心脏麻痹而突然死亡，这种病型叫恶性口蹄疫，死亡率高达25%- 50%。犊牛发病时往往看不到特征性水疱，主要表现为出血性胃肠炎和心肌炎，死亡率很高。

4．检验检疫

    (1)病料的采集

    我们目前主要采集病猪高热时期的耳静脉血；死亡的病猪可采集血液心脏、食道、咽部、口腔粘膜的粘液。

    (2)诊断方法

①特异性诊断的常规法是补体结合反应试验和乳鼠中和试验。就是将采集的咽部食道刮取物（O-P液）。接种到幼仓鼠肾细胞(BHK21)进行37度静置培养3d，每天观察记录、结果。当出现细胞病变效应( CPE)时及时收样，将收获的出现CPE的样品，用BHK21细胞增殖2代，然后按常规方法做反向间接试验。

    ②反向间接红细胞凝集试验，仍不失有检疫实用价值。口蹄疫反向间接红细胞凝集试验的判定：出现“++”以上凝集的被检抗原的最高稀度为反向间接血凝效价，或某种毒型的效价高于其他毒型效价2个对数（以2为底）滴度以上者，即可判为某型口蹄疫。

    ③在口蹄疫检测中，多用相关抗原VIA免疫琼脂扩散试验和对流免疫电泳试验。目前，已发展到克隆抗体技术，并进而期望应用核糖酸探针技术。

    ④用酶联免疫吸附测定口蹄疫病毒抗体是我们现在用的最多的试验。UIB口蹄疫病毒诊断检测试剂盒能够分析出猪只动物、反刍动物的非感染、接种疫苗和自然感染的鉴别，但不能为其定型。原理：此产品试剂盒是采用口蹄疫病毒合成肽固相化抗原包被于微孔板的微孔上，这些多肽代表了口蹄疫病毒非结构蛋白3B中具有高度抗原性的蛋白片断。在相应的反应孔中加入稀释的对照和待检血清，经孵育后，若样品中含有口蹄疫病毒特异性抗体，则将与多肽抗原结合吸附于反应孔表面，经洗涤后除去未结合抗体和样品其他组分后；再加入辣根过氧化物酶标记物的基因重组蛋白A／G，发生特异性结合；再经洗涤将除去未结合的酶结合物，在各孔内加入TMB底物液，将产生酶分解TMB的蓝色产物，颜色的深浅与待测样品中口蹄疫病毒结构蛋白特异性抗体含量成正比，加入硫酸溶液终止反应后，用酶标仪450mm波长测定各反应孔中的OD值。

    实验结果判断值：

    A①两孔的阴性对照OD平均值≤0.2；

    ②两孔的阳性对照OD平均值≥0.5；

    ③临界值：0.23X（阳性对照OD平均值）。

    B①样品OD值≤临界值。初检阴性。可视为FMDV抗体阴性V。

    ②样品OD值≥临界值。初检阳性。应重做，每份平行做二孔。

    ③若重做中两孑L皆为阴性。可视为FMDV抗体阴性，不需重做。

    ④若任一孔为阳性。视为FMDV抗体呈现阳性。

    ⑤重复实验的阳性样本，可视为FMDV抗体呈现阳性。

    此种方法简单、快速、准确率比较高，是我们当前应用最广的方法之一。

5．预防和治疗

    (1)预防在本病的常发区，受威胁区，对家畜定期接种口蹄疫疫苗应当提到的是：所用疫苗病毒型必须与当地流行病毒型相一致，否则不能预防和控制口蹄疫的发生和流行。

(2)治疗发病初期体温升高者，可用复方氨基比林30 - 40mL，大青叶注射液30 -40mL，地塞米松30 -50g，肌肉注射。还可内服清瘟败毒散。对口腔的水疤或烂斑处用0.1%高锰酸钾水或3%硼酸水冲洗，然后抹碘甘油，蹄部和乳房部位的水疤或烂斑可用紫药水或抗菌消炎软膏涂敷。

6．卫生处理

    (1)发生口蹄疫后，应立即上报疫情，划定疫区，严格封锁，就地扑灭，严防蔓延。

    (2)疫点内的家畜逐一进行检疫，病畜就地治疗或烧毁深埋。

    (3)疫点内和周围受威胁未感染的立即接种疫苗，接种顺序由外向内。

    (4)对病畜污染的圈舍，饲槽、工具和粪便用2%氢氧化钠溶液消毒。最后一头病畜痊愈或死亡14d后，无新病例出现，经彻底消毒报上级部门批准后解除封锁。